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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章genaxxon M3009.0250說明書

genaxxon M3009.0250說明書

更新時(shí)間:2019-01-23點(diǎn)擊次數(shù):1916

genaxxon M3009.0250說明書

產(chǎn)品信息“SNP Pol DNA Polymerase”

SNP Pol DNA聚合酶,用于簡便,可靠和快速的等位基因特異性鑒別,例如。CRISPR / Cas9點(diǎn)突變,用于檢測錯誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物,或驗(yàn)證測序結(jié)果。SNP Pol DNA聚合酶區(qū)分高度特異性,是否存在引物 - 模板復(fù)合物的錯配。錯配(點(diǎn)突變)必須位于引物的3'末端。因此,突變等位基因可以與野生型等位基因*區(qū)分 - 無需測序,因?yàn)榫酆厦冈阱e配的情況下不會放大。

只需將您的引物置于假定的點(diǎn)突變上(重要:點(diǎn)突變必須位于3'末端),聚合酶將檢測到該區(qū)域的錯配,幾乎100%準(zhǔn)確:如果模板堿基與3'末端互補(bǔ)引物顯示突變而引物不顯示,不會發(fā)生擴(kuò)增 - 在短時(shí)間內(nèi)100%確定!
因此,SNP Pol DNA聚合酶可以容易地,時(shí)間和成本有效地用于點(diǎn)突變的篩選。

變體SNP PolTaq DNA聚合酶具有5'-3'核酸酶活性,因此可用于特定的水解探針,例如Taqman探針或分子信標(biāo)。

測試樣品以*出售!德國境內(nèi)沒有運(yùn)輸費(fèi)用。測試樣品價(jià)格將在產(chǎn)品的個正式訂單中退還。

描述
SNP Pol DNA聚合酶>(Hi gh Di鑒定單核苷酸)是一種高選擇性的DNA聚合酶。它專門針對需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開發(fā):例如等位基因特異性PCR(ASA; AS-PCR),等位基因特異性引物延伸(AS-PEX),SNP分析,基因分型或甲基化特異性PCR(MSP)。許多其他DNA聚合酶耐受錯配的引物 - 模板復(fù)合物,因此不適合。另一方面,SNP Pol DNA聚合酶特異性地區(qū)分這些(高鑒別度)并僅提供具有*匹配的引物對的PCR產(chǎn)物!通過兩個等位基因之間的等位基因特異性PCR,Genaxxon SNP Pol和SNP PolTaq DNA聚合酶的差異高達(dá)100%,并且在簡單的qPCR之后,給出關(guān)于哪個等位基因存在的清楚結(jié)果。從而,

等位基因特異性PCR可用于量化野生型序列的庫或背景中的突變率。由NGS確定的突變頻率的驗(yàn)證   也可以通過等位基因特異性PCR和SNP Pol DNA聚合酶來驗(yàn)證。SNP PolTaq DNA聚合酶非常適合分析  液體活檢  樣品。使用SNP PolTaq,可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。

圖片如下:應(yīng)用說明SNP Pol DNA Polymerase

HiDi DNA聚合酶應(yīng)用簡報(bào)

 

我們建議設(shè)計(jì)具有短擴(kuò)增子長度(約60-200 bp)的引物以獲得良結(jié)果,但也可以使用更長的擴(kuò)增子長度。如果擴(kuò)增子長> 500 bp,可能需要添加額外的鎂(+0.5-1.5mM)。

SNP Pol DNA聚合酶(M3009>  或  M3061>)可與非特異性熒光染料(例如Genaxxon的  Green DNA Dye>  或SybrGreen®)一起用于實(shí)時(shí)PCR。當(dāng)使用特異性PCR探針時(shí),可以僅使用SNP PolTaq DNA聚合酶,因?yàn)橹挥羞@些具有5'-3'外切核酸酶活性。

我們的高質(zhì)量dNTP如Set(M3015.4100)>  或  Mix(M3016.1010)>  或我們的  DNA Ladders> 和我們有利的  標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖(M3044)>  我們可以為您的PCR提供其他產(chǎn)品。

SNP Pol DNA和SNP Pol DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域
- 點(diǎn)突變的監(jiān)測,驗(yàn)證和檢測
- 正確或錯誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物
的鑒定
- 測序結(jié)果的驗(yàn)證/驗(yàn)證- 突變的定量(例如NGS結(jié)果)
- SNP檢測等位基因特異性擴(kuò)增(ASA)/等位基因特異性PCR 
- 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR(MSP)(CpG甲基化側(cè))
- HLA基因分型
- 微量測序
- 水解探針實(shí)時(shí)PCR 
- 實(shí)時(shí)多重PCR

- 秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數(shù)據(jù)。

作為ChIP的替代方案,近顯示通過測序(DamID-seq)鑒定DNA腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶能夠表征單個哺乳動物細(xì)胞中的結(jié)合位點(diǎn)。另外,通過以受控方式在組織特異性啟動子下表達(dá)Dam融合蛋白,可以實(shí)現(xiàn)DamID用于細(xì)胞類型特異性分析。在本報(bào)告中,我們提供了一個用戶友好的管道來分析秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數(shù)據(jù)。

 

技術(shù)數(shù)據(jù):

規(guī)格:
SNP Pol DNA聚合酶以5 U /μL溶液形式提供。它配有優(yōu)化的10倍反應(yīng)緩沖液。
SNP Pol DNA聚合酶不顯示5'-3'外切核酸酶活性!不適用于與例如TaqMan TM探針的水解探針一起使用。

申請:

- 點(diǎn)突變的監(jiān)測,驗(yàn)證和檢測 - 正確或錯誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物的鑒定 - 測序結(jié)果的驗(yàn)證/驗(yàn)證 - 突變的定量(例如NGS結(jié)果) - 通過等位基因特異性擴(kuò)增(ASA)/等位基因的SNP檢測 - 特異性PCR - 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR(MSP) - HLA基因分型 - 微量測序 - 實(shí)時(shí)PCR(無水解探針;使用SNP PolTaq) - 實(shí)時(shí)多重PCR

資源

REC。來自大腸桿菌

SNP聚合酶是一種高選擇性的DNA聚合酶變異體。它已被選定用于鑒別程度較高的檢測。 例如在等位基因特異性PCRS或甲基化特異性PCRS中。許多dna聚合酶能耐受不匹配的引物-模板復(fù)合物,而snp pol dna聚合酶則能有效地鑒別Th。 OSE只在*匹配引物對的情況下產(chǎn)生特定的擴(kuò)增。這使得SnPol DNA聚合酶在SNP檢測、HLA基因分型或單個CpG分析中非常有用。 加注地點(diǎn)。

SNP Pol DNA聚合酶能有效地區(qū)分3‘端不匹配的引物.3‘位錯配引物是識別SNPs的要求. 如果突變/錯配位于引物的另一個位置,SNP POL和SNP PolTaq聚合酶將像“正常”Taq聚合酶一樣工作。

該工程聚合酶也可作為SNP PolTaq DNA聚合酶版本,具有5‘-3’-核酸酶活性,因此可用于基于水解探針的檢測(Taqman探針,molec)

 

商品概述

濃度:5單位/升

底物類似物:dNTP,ddNTP,熒光dNTP/ddNTP

延伸率:1 kb/min。在72°C

半衰期:20分鐘。95°C,60 min。在94°C

5‘-3’外核酶活性:SNP POL聚合酶NO/SNP PolTaq聚合酶YES)

3‘-5’外核酶活性:NO

核酸酶污染:否

蛋白酶污染:否

 

 

單位定義

SNP POL/SNP Poltaq dna-Polymerase的一個單位定義為在72℃下,在72℃下,將10 nmol的dntp酶在30分鐘內(nèi)加入到酸不溶性組分中的酶量。 .

質(zhì)量管理

PCR活性:SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶PCR檢測HeLa基因組DNA中的基因組SNP(Rs 72921001)。PCR產(chǎn)物隨后在 2.5%瓊脂糖凝膠。用etSNP溴化Polum染色法在匹配引物的正確擴(kuò)增長度為109 bp的條件下,觀察到一種特異的產(chǎn)物。在不匹配引物的情況下,不生成產(chǎn)物。 在50個周期后可見。

DNA聚合酶活性:用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶活性,并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。

 

適用,應(yīng)用,運(yùn)用

·SNP-等位基因特異性擴(kuò)增(ASA)/等位基因特異性PCR檢測

甲基化特異性PCR(MSP)

·HLA基因分型

·多重PCR

穩(wěn)定(性),穩(wěn)固

Genaxxon生物科學(xué)SNP POL和SNP PolTaq DNA-聚合酶在濕冰上運(yùn)輸,但在RT(15°C~25°C)下保持活性至少2周。

SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶(包括緩沖器和試劑)應(yīng)在收到-20°C時(shí)立即儲存,在這些條件下儲存并正確處理,這些產(chǎn)品可以 保持至少到有效期(見管標(biāo)簽),而不顯示任何性能下降。Genaxxon生物科學(xué)SNP POL和SNP Poltaq DNA聚合酶也可在2°C-8保存。 c多3個月。

 


 

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