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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章Cytoskeleton BK163-S說明書

Cytoskeleton BK163-S說明書

更新時間:2019-02-18點擊次數(shù):2290

Cytoskeleton,Inc。成立于1993年。從一開始我們就不斷擴(kuò)展我們的產(chǎn)品線。

Cytoskeleton,Inc。很高興為藥物篩選,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chǎn)品。我們專注于生產(chǎn)純化蛋白質(zhì)和易于使用的試劑盒,以研究生物化學(xué)和細(xì)胞過程。我們的試劑盒可用于少量樣品,用于基礎(chǔ)研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用于大屏幕的高通量樣品(CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們現(xiàn)有的產(chǎn)品,我們還在產(chǎn)品線中為微管,微管蛋白,運動蛋白,小G蛋白效應(yīng)物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務(wù)。

Cytoskeleton BK163-S說明書

 

Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒(10次檢測)

10種檢測方法(Cat。#BK163-S)

Signal-Seeker™系列產(chǎn)品的開發(fā)旨在簡化專家和非專業(yè)人士對關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng),可從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質(zhì)。然后使用針對靶蛋白的抗體通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

產(chǎn)品用途包括

  • 調(diào)查瞬態(tài)監(jiān)管機(jī)制
  • 測量多種途徑成員蛋白的信號傳導(dǎo)事件 
  • 發(fā)現(xiàn)您感興趣的蛋白質(zhì)的新修改
  • 深入了解監(jiān)管機(jī)制
  • 測量內(nèi)源性或瞬時表達(dá)的蛋白質(zhì)信號傳導(dǎo)事件

 

套件內(nèi)容

乙酰賴氨酸試劑盒包含以下組分:

裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)清除步驟洗步驟洗脫步驟西部一步

 BlastR™裂解緩沖液

 BlastR™稀釋緩沖液

 BlastR™過濾器

 蛋白酶抑制劑雞尾酒

 HDAC抑制劑雞尾酒

 Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑

 乙酰賴氨酸親和珠

 IP控制珠

 

 

 

 

 BlastR™洗滌緩沖液

 

 

 

 

 

 旋轉(zhuǎn)列

 珠子洗脫緩沖液

 

 

 

 

 化學(xué)發(fā)光試劑A.

 化學(xué)發(fā)光試劑B.

 抗乙酰賴氨酸-HRP抗體

 

 

 

 

示例結(jié)果

這些套件有很多應(yīng)用,這里我們描述一個有趣的例子:

應(yīng)用1:調(diào)查顯著的乙酰化事件

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒進(jìn)行免疫沉淀,與細(xì)胞信號傳導(dǎo)乙酰賴氨酸抗體和免疫組化乙酰賴氨酸親和珠相比較

圖1.各種乙酰基 - 賴氨酸親和試劑用于來自Cos-7細(xì)胞的IP乙酰化蛋白質(zhì),用TSA(1m M)和煙酰胺(1mM)處理(+)或未處理( - )6小時。(1)16.7  AAC04珠漿液(20升克抗體)。(2)50  AAC04珠漿液(60升克抗體)。(3)抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物(Cell Signaling,按制造商的說明書1:100)。(4)乙酰ImmuneChem賴氨酸親和力珠(40 克抗體)。(5)ImmunChem乙酰賴氨酸珠(80 克抗體)。(6)正常小鼠IgG對照珠(60 g抗體)。洗脫富集的乙酰化蛋白質(zhì)的總曲線,并通過蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP抗體(1:3000)分析。AAC04在富集廣泛的乙酰化蛋白質(zhì)方面表現(xiàn)出色,而其他商業(yè)乙酰賴氨酸富集試劑主要富集豐富的乙酰化蛋白質(zhì)(例如乙酰化微管蛋白和組蛋白)。

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒免疫沉淀靶特異性乙酰化蛋白

圖2A:使用BlastR緩沖液分離A431細(xì)胞,未處理( - )或用1m M TSA和1mM煙酰胺處理(+)6小時。使用AAC04珠(60m g)進(jìn)行IP 。通過SDS-PAGE分離總細(xì)胞裂解物(輸入)和免疫沉淀的樣品,并通過蛋白質(zhì)印跡用針對EGFR的抗體(Millipore,1:1000),Hsp90(Abcam,1:20,000),P53(Sigma,1:2000)進(jìn)行分析,和RhoDGI(Millipore,1:1000)

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒從肝臟和心臟組織中免疫沉淀乙酰化蛋白

圖2B:用BlastR緩沖液獲得小鼠組織提取物(肝臟和心臟)。使用AAC04珠(60,進(jìn)行IP  g)或mIgG對照珠(#CIG02,60 在組織提取物的1mg的克)。通過SDS-PAGE分離富集的蛋白質(zhì),并通過蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP(1:3000)分析。

 

 

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