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mdbioproducts M046013使用方法

 更新時間:2021-06-25 點擊量:1149

 

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 mdbioproducts M046013使用方法

EPO ELISA

Erythropoietin (EPO) ELISA
Catalog Number: 
 M046013
Qty/Size: 

 96 wells

 EPO ELISA 試劑盒旨在測量人血清中的促紅細胞生成素 (EPO) 水平。該測定旨在用于研究用途,作為診斷貧血和紅細胞增多癥的輔助手段。隨著重組促紅細胞生成素作為增加紅細胞質量的生物療法的出現,促紅細胞生成素測定也可用于幫助預測和監測貧血患者對重組促紅細胞生成素治療的反應。

 

 

概述: 

促紅細胞生成素(EPO) 是一種高度糖基化的蛋白質,分子量約為 30,000 - 34,000 道爾頓。人EPO是一種由165個氨基酸組成的多肽,含有一個O-連接和三個N-連接的碳水化合物鏈。重組 EPO 是用于免疫分析的天然蛋白質的良好替代品。血清 EPO 水平取決于蛋白質的產生率和清除率。90% 的 EPO 是在成人腎臟的管周細胞中產生的,以響應組織氧合的減少。有證據表明,這些細胞上檢測血液氧飽和度的蛋白質是含血紅素的部分。隨著血漿的 pO2(血細胞比容的函數)降低,EPO 濃度將增加。

 

血清促紅細胞生成素濃度的定量可作為確定貧血或紅細胞增多癥原因的診斷輔助手段。再生障礙性貧血、溶血性貧血和缺鐵性貧血都會導致血清EPO升高。然而,由于腎功能衰竭和其他疾病如獲得性免疫缺陷綜合征 (AIDS) 引起的繼發性貧血患者的 EPO 水平通常低于貧血程度。這很可能是由于患病腎臟產生足量 EPO8 的能力受損所致。低濃度的 EPO 可能會發出腎移植排斥反應的早期預警。EPO 還可用于監測接受齊多夫定 (AZT) 治療的艾滋病患者。EPO 濃度增加證實與 AZT 治療相關的貧血是由于紅細胞發育不全或發育不全。

 

真性紅細胞增多癥或原發性紅細胞增多癥(紅細胞量增加)是由于未受刺激的紅細胞過度產生所致。因此,血紅蛋白的增加會導致 EPO 的產生減少,從而導致血清 EPO 水平低于正常水平。繼發性紅細胞增多癥也以總紅細胞量增加為特征,是對組織缺氧引起的循環 EPO 水平升高的生理反應。缺氧可能是由于肺纖維化、心血管疾病、長期暴露于高海拔、血紅蛋白異常或藥物治療等因素造成的。一些腫瘤會產生 EPO,在這些情況下,EPO 可用作腫瘤標志物來監測治療效果。

 

 

 

數據/規格: 

物種:人類

樣品類型:  血清

樣品量:  200 uL

標準曲線范圍:  7.5 - 500 mU/mL

靈敏度:  1.2 mU/mL

檢測時長:   2.5 小時

 

這個怎么運作: 

EPO 免疫測定是一種雙位點 ELISA(酶聯免疫吸附測定),用于測量 EPO 的生物活性 165 個氨基酸鏈。它利用兩種不同的小鼠單克隆抗體對抗人類 EPO,對 EPO 分子上明確定義的區域具有特異性。一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體被生物素化,另一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體用辣根過氧化物酶 (HRP) 進行標記以進行檢測。 

 

在該測定中,校準品、對照品或患者樣品在鏈霉親和素包被的微孔板中與酶標抗體和生物素偶聯抗體同時孵育。在測定溫育結束時,洗滌微孔以除去未結合的成分,并將結合到固相的酶與底物四甲基聯苯胺 (TMB) 溫育。然后加入酸性終止溶液以終止反應并將顏色轉化為黃色。黃色的強度與樣品中 EPO 的濃度成正比。使用從校準器獲得的結果生成吸光度單位與濃度的劑量響應曲線。對照和患者樣品中存在的 EPO 濃度直接從該曲線確定。這些標準已經根據世界衛生組織 (WHO) 促紅細胞生成素國際標準進行了校準,該標準由重組 DNA 衍生的 EPO 組成。使用的 WHO 參考標準是促紅細胞生成素第一國際標準 (87/684)。

 

促紅細胞生成素 (EPO) ELISA

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