價錢： 80.00 美元 貨號： ELSP-1

ELISA 蛋白提取、分離和溶解緩沖液

60 ml、1X、pH 7.4 溫和的去污劑蛋白質(zhì)提取緩沖液，可保持 ELISA 樣品分離所需的抗體-抗原相互作用。從大多數(shù)細(xì)胞隔室中提取蛋白質(zhì)，包括用于 ELISA 樣品制備的膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器。  

強(qiáng)調(diào)

• 用于 ELISA 樣品制備的經(jīng)過驗(yàn)證的配方。

• 廣泛適用于大多數(shù)用于 ELISA 樣品制備的細(xì)胞質(zhì)、跨膜和細(xì)胞外蛋白。

• 方便的預(yù)混合 1X 溶液。

• 與 Bradford 等蛋白質(zhì)濃度測定兼容。

  內(nèi)容                                                                                                                                       

1. 60 ml ELISA 蛋白提取緩沖液 pH 7.4
   

ELISA 蛋白提取緩沖液含有溫和的去污劑，能夠溶解細(xì)胞膜、溶解大多數(shù)膜蛋白并將胞質(zhì)蛋白懸浮到緩沖液中。 

  方案概述：ELISA 蛋白提取緩沖液                                                                      

1. 為每個 10 厘米培養(yǎng)皿準(zhǔn)備 500 µl ELISA 蛋白提取緩沖液，或?yàn)?6 孔培養(yǎng)皿中的每個孔準(zhǔn)備 200 µl。使溶液冰冷并加入蛋白酶抑制劑，包括絲氨酸蛋白酶抑制劑（如 PMSF）。如果需要，還可以添加通用磷酸酶抑制劑。
   

2. 取出培養(yǎng)基并用 PBS 沖洗細(xì)胞 3 次。

3. 在每個 10 厘米的培養(yǎng)皿中加入 500 µl ELISA 蛋白提取緩沖液。旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，用 ELISA 蛋白提取緩沖液覆蓋細(xì)胞，并在冰床上放置 5 分鐘。

4. 從培養(yǎng)皿上刮下細(xì)胞，然后轉(zhuǎn)移到合適的管中。旋轉(zhuǎn)并輕敲試管數(shù)次以溶解膜。您應(yīng)該觀察與基因組 DNA 相對應(yīng)的纖維材料，這是細(xì)胞裂解的指標(biāo)。如果纖維材料不明顯，加入 20 µl ELISA 蛋白提取緩沖液等分試樣，旋轉(zhuǎn)并輕敲直到觀察到纖維材料。將管子在冰上再放置 15 分鐘。 

5. 4 ^o C離心15 分鐘，收集上清液，用于 ELISA 檢測。蛋白質(zhì)濃度測定，例如 Bradford 測定，可用于量化總蛋白質(zhì)濃度。將上清液也可以被存儲在-80 ^? C長術(shù)語