| 有可能的使用 | 用于莫氏體外診斷 | |||||||||||||||||||||
| 總結(jié)與說明 | Mohs小鼠/兔 PolyDetector DAB HRP Brown 檢測系統(tǒng)是一種單步 Fab 微聚合物檢測系統(tǒng)，可用于在低溫恒溫器切片、福爾馬林固定石蠟包埋組織和細(xì)胞制劑中展示抗原。Mohs PolyDetector 試劑盒是使用與單體 Fab' 免疫球蛋白部分偶聯(lián)的微生物聚合物開發(fā)的，該部分靶向小鼠和兔抗體的 Fc 區(qū)。此外，微生物聚合物標(biāo)有高質(zhì)量的 HRP，以實(shí)現(xiàn)最大的靈敏度。這確保了出色的細(xì)胞滲透，從而在不同類型的冷凍、FFPE 組織和細(xì)胞制劑中對所有類型的核、細(xì)胞質(zhì)和膜抗原產(chǎn)生一致、可重復(fù)的靈敏和特異性免疫檢測。 Mohs Mouse/Rabbit PolyDetector DAB HRP Brown 檢測系統(tǒng)提高了靈敏度，可在不影響染色質(zhì)量的情況下進(jìn)行快速 IHC 程序。Mohs小鼠/兔 PolyDetector DAB HRP Brown 檢測系統(tǒng)適用于小鼠 IgG 和 IgM 以及兔一抗，包括單克隆和多克隆。Mohs小鼠/兔 PolyDetector DAB HRP Brown 檢測系統(tǒng)試劑盒經(jīng)過優(yōu)化，可與Bio SB TintoFast 一抗配合使用；但是，它們是通用試劑盒，因此只要經(jīng)過適當(dāng)優(yōu)化，它們就可以與來自不同供應(yīng)商的抗體同樣有效。 | |||||||||||||||||||||
| 介紹 | Mohs小鼠/兔 PolyDetector DAB HRP 棕色檢測系統(tǒng)包含抗小鼠/兔辣根過氧化物酶微生物聚合物溶液、HRP 棕色緩沖底物和 HRP 棕色色原溶液。所有組分都用穩(wěn)定劑和非疊氮化物抗微生物劑緩沖。 | |||||||||||||||||||||
| 可用性 |
| |||||||||||||||||||||
莫氏冷凍組織的標(biāo)本制備
將標(biāo)本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nèi)。
在 4-5 µm 處切割切片并安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus Slides (BSB 7028) 或 TintoDetector Cap Gap Plus (BSB 7006)。
在室溫下風(fēng)干載玻片 2 分鐘，然后在培養(yǎng)箱或干浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鐘。
在 100% 丙酮中固定并風(fēng)干或在室溫下用 10% NBF 固定 2 分鐘，然后用蒸餾水沖洗并風(fēng)干。
冷凍組織預(yù)處理取決于感興趣的目標(biāo)。請參閱產(chǎn)品說明書中的一抗以確定適當(dāng)?shù)念A(yù)處理方案。
莫氏冷凍組織的組織預(yù)處理程序
使用 Bio SB ImmunoDNA Retriever with Citrate (BSB 0020-BSB 0023)、ImmunoDNA Retriever with EDTA (BSB 0030-BSB 0033) 或 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 對組織進(jìn)行表位修復(fù)。建議用戶選擇使用 110°C 壓力鍋 (BSB TintoRetriever Pressure Cooker) 的 5 分鐘熱誘導(dǎo)表位修復(fù) (HIER) 方法，或 1 分鐘蛋白水解誘導(dǎo)表位修復(fù) (PIER) 方法（用于細(xì)胞角蛋白使用 10% NBF 固定組織）。10% NBF 固定組織的形態(tài)學(xué)較好，尤其是在使用蛋白水解誘導(dǎo)表位修復(fù)方法時(shí)，然而，在 100% 丙酮固定組織上可能更容易檢測到抗原。
可以使用三種 HIER 方法中的任何一種：
一個(gè)。TintoRetriever 壓力鍋或同等產(chǎn)品
將組織/載玻片放入裝有含有檸檬酸鹽或 EDTA 或 TintoDeparaffinator 檸檬酸鹽或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 的染色盤或 coplin 罐中，然后放在高壓鍋的三腳架上。在壓力鍋中加入 1-2 英寸的蒸餾水，然后將熱量調(diào)高（110-121°C）。孵育 15 分鐘。釋放蒸汽，打開并立即將載玻片轉(zhuǎn)移至室溫。
灣。TintoRetriever PT 模塊或水浴法
在 95°-99°C 下將組織/載玻片放入預(yù)熱的染色皿或裝有 ImmunoDNA Retriever with Citrate or EDTA 或 TintoDeparaffinator Citrate or EDTA 的染色皿中。孵育 30-60 分鐘。立即打開并將載玻片轉(zhuǎn)移至室溫。
C。傳統(tǒng)蒸鍋法
將組織/載玻片放入預(yù)熱的染色盤或裝有檸檬酸鹽或 EDTA 或 Tintodeparaffinator 檸檬酸鹽或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 的染色皿或 coplin 罐中，蓋上蓋子并蒸 30-60 分鐘。熱處理后，將載玻片轉(zhuǎn)移到含有檸檬酸鹽或 EDTA 或 Tintodeparaffinator Citrate 或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中至室溫并靜置 15-20 分鐘。
3. 對于PIER，在室溫下使用 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 1 分鐘，然后清洗。
IHC 檢測程序
在 HIER 或 PIER 之后，將載玻片轉(zhuǎn)移到 ImmunoDNA 清洗機(jī)并靜置 1-2 分鐘。
對于手動(dòng)染色，在環(huán)境溫度下進(jìn)行抗體孵育。對于自動(dòng)染色方法，請根據(jù)儀器制造商的說明進(jìn)行抗體孵育。
用 ImmunoDNA 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續(xù) Mohs IHC 檢測方案。用 ImmunoDNA 洗滌液在每個(gè)步驟之間清洗載玻片。
縮寫 Mohs 免疫組化方案
| 步 | Mohs PolyDetector HRP Brown 協(xié)議 |
| 一抗 | 4 分鐘 |
| 檢測步驟 | 3 分鐘 |
| 底物色原 | 2 分鐘 |
| 復(fù)染/蓋玻片 | 0.5 分鐘 |
