一、基礎(chǔ)信息
品牌:Activity Signaling
英文名:Anti-Npas4 Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody
中文名:重組抗Npas4兔單克隆抗體
貨號(hào):AS-AB18A-100(100μl)、AS-AB18A-300(300μl)
宿主物種:兔
靶點(diǎn):Npas4(神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白4)
應(yīng)用范圍:免疫印跡(WB)、免疫組織化學(xué)(IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等
抗體濃度:1 mg/ml(無菌PBS保存)
保存條件:短期4℃運(yùn)輸,長期-20℃分裝凍存
靈敏度與特異性:通過原代神經(jīng)元免疫熒光、腦切片IHC及WB驗(yàn)證,背景信號(hào)極低;Npas4基因敲除(KO)小鼠樣本中無交叉反應(yīng),特異性強(qiáng)。
二、原理與技術(shù)背景
Npas4(Neuronal PAS Domain Protein 4)是神經(jīng)元特異性即刻早期基因(IEG)編碼的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,屬于bHLH-PAS蛋白家族成員。其表達(dá)受神經(jīng)元活動(dòng)強(qiáng)烈誘導(dǎo),且對突觸鈣離子內(nèi)流敏感,但對cAMP或神經(jīng)營養(yǎng)因子等旁分泌信號(hào)無響應(yīng)。相較于傳統(tǒng)IEG(如c-Fos、Arc),Npas4具有以下特性:
1. 快速且短暫的表達(dá):神經(jīng)元活動(dòng)后數(shù)分鐘內(nèi)即可檢測到Npas4表達(dá),1小時(shí)內(nèi)恢復(fù)基線水平,適合研究短期神經(jīng)可塑性。
2. 高特異性:僅對神經(jīng)元活動(dòng)敏感,不響應(yīng)應(yīng)激或非神經(jīng)元信號(hào)(如MK-801阻斷NMDA受體后c-Fos仍升高,但Npas4不受影響)。
3. 功能關(guān)鍵性:調(diào)控抑制性突觸發(fā)育、記憶形成及行為可塑性,是神經(jīng)科學(xué)研究的理想標(biāo)記物。
該抗體基于重組兔單克隆技術(shù)開發(fā),通過靶向Npas4的特異性表位,結(jié)合基因敲除驗(yàn)證,確保檢測的精準(zhǔn)性。其重組特性減少了批次間差異,提高了實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。
三、解決的核心實(shí)驗(yàn)問題
1. 精準(zhǔn)標(biāo)記神經(jīng)元活動(dòng)
傳統(tǒng)IEG(如c-Fos)易受非神經(jīng)元信號(hào)干擾,而Npas4抗體可特異性識(shí)別近期活躍神經(jīng)元,避免“假陽性"結(jié)果。例如,在情境恐懼條件反射實(shí)驗(yàn)中,Npas4僅在刺激后1小時(shí)內(nèi)短暫表達(dá),與記憶編碼窗口高度吻合。
2. 區(qū)分不同腦區(qū)神經(jīng)元亞群
研究表明,Npas4與c-Fos在部分腦區(qū)(如海馬齒狀回)標(biāo)記相同神經(jīng)元,但在CA1區(qū)可能標(biāo)記不同群體,提示其空間特異性。該抗體可輔助解析神經(jīng)活動(dòng)的區(qū)域異質(zhì)性。
3. 動(dòng)態(tài)研究突觸可塑性
Npas4調(diào)控抑制性突觸發(fā)育,其表達(dá)水平與長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)相關(guān)。通過該抗體,可結(jié)合ChIP-Seq或iDISCO全腦染色技術(shù),揭示基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
4. 替代傳統(tǒng)標(biāo)記物的局限性
傳統(tǒng)IEG(如Arc、Egr1)表達(dá)時(shí)間窗口長且易受環(huán)境因素干擾,而Npas4抗體可提供更高分辨率的神經(jīng)元活動(dòng)時(shí)間譜,適用于光遺傳學(xué)、行為學(xué)干預(yù)后的即時(shí)檢測。
四、產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 高特異性與靈敏度
- 通過Npas4-KO小鼠驗(yàn)證,背景信號(hào)極低(IHC背景<5%)。
- WB檢測限低至10 ng蛋白,可檢測原代神經(jīng)元或組織裂解液中的低豐度Npas4。
2. 廣泛的應(yīng)用兼容性
- 支持多種樣本類型:原代神經(jīng)元、腦切片、睪丸組織(已驗(yàn)證)等。
- 適配主流實(shí)驗(yàn)方法:WB(1:500-1:2000)、IHC(1:100-1:500)、ICC(1:100)。
3. 批次穩(wěn)定性與長期保存
- 重組單抗生產(chǎn)工藝確保批次間一致性,避免傳統(tǒng)雜交瘤技術(shù)的變異風(fēng)險(xiǎn)。
- 分裝凍存設(shè)計(jì)減少反復(fù)凍融導(dǎo)致的抗體降解,適合長期實(shí)驗(yàn)需求。
4. 科研與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)支持
- 已應(yīng)用于記憶模型(如Morris水迷宮)、神經(jīng)退行性疾病機(jī)制研究(如阿爾茨海默病模型),助力靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)與藥物篩選。
五、客戶群體
1. 基礎(chǔ)神經(jīng)科學(xué)研究者
- 從事神經(jīng)元活動(dòng)編碼、突觸可塑性、學(xué)習(xí)記憶機(jī)制的實(shí)驗(yàn)室。
- 需求場景:標(biāo)記近期活躍神經(jīng)元、解析神經(jīng)環(huán)路功能。
2. 藥理學(xué)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)團(tuán)隊(duì)
- 研發(fā)神經(jīng)精神疾病藥物(如抗抑郁藥、抗癲癇藥)的企業(yè)或機(jī)構(gòu)。
- 應(yīng)用方向:評估藥物對神經(jīng)元活性的調(diào)控效應(yīng),篩選潛在治療靶點(diǎn)。
3. 行為學(xué)與影像學(xué)研究平臺(tái)
- 結(jié)合光遺傳學(xué)、化學(xué)遺傳學(xué)技術(shù),需高精度神經(jīng)元標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)。
- 典型案例:通過Npas4抗體驗(yàn)證光遺傳激活的神經(jīng)元亞群。
六、訂貨信息
供應(yīng)商:上海起發(fā)
運(yùn)輸與售后:
- 冰袋冷鏈運(yùn)輸,確保抗體活性。
- 提供技術(shù)支持:實(shí)驗(yàn)方案優(yōu)化、陽性對照樣本推薦(如原代皮質(zhì)神經(jīng)元裂解液)。
七、文獻(xiàn)支持與驗(yàn)證數(shù)據(jù)
- Western Blot驗(yàn)證:在小鼠腦組織裂解液中檢測到約90 kDa條帶,與預(yù)期分子量一致。
- 免疫熒光共定位:與NMDA受體激活誘導(dǎo)的鈣信號(hào)共定位,證實(shí)其與神經(jīng)元活動(dòng)的直接關(guān)聯(lián)。
- 基因敲除驗(yàn)證:Npas4-KO小鼠樣本中無免疫反應(yīng)性,排除非特異性結(jié)合。
八、總結(jié)
Anti-Npas4 Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody憑借其高特異性、廣泛適用性及科研轉(zhuǎn)化價(jià)值,已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的重要工具。無論是探索基礎(chǔ)神經(jīng)機(jī)制,還是開發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)疾病療法,該抗體均能提供可靠的實(shí)驗(yàn)支持。建議研究者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適規(guī)格,并聯(lián)系供應(yīng)商獲取技術(shù)指導(dǎo)以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程。
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