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Haematologic HCPG-0132說明書

 發(fā)布時間:2018/10/16 點擊量:335

Haematologic HCPG-0132說明書

HTI HCPG-0132

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCPG-0132說明書

glu-Plasminogen,lys-Plasminogen和carbohydrate variants

 

人纖溶酶
人纖溶酶原的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)表示,其中:K1-K5 = 5個三環(huán)域,B-CHAIN =纖溶酶的催化結(jié)構(gòu)域,并且箭頭表示蛋白水解裂解的纖溶酶,彈性蛋白酶,和纖維蛋白溶酶原活化劑(PA'S)的位點。

纖溶酶原是單鏈糖蛋白酶原,其在肝臟中合成并在血漿中以約2.4μM(1,2)的濃度循環(huán)。纖溶酶原分子在Lys77和Arg560之間含有790個氨基酸,24個二硫鍵,沒有游離巰基和5個內(nèi)部序列同源區(qū)域,稱為kringles。這五個三環(huán),三個二硫鍵橋接的kringle區(qū)域與t-PA,u-PA和凝血酶原中的三環(huán)結(jié)構(gòu)域同源。纖溶酶原含有一個高親和力(Kd = 9×10-6M)和四個低親和力(Kd = 5×10-3M)賴氨酸結(jié)合位點。高親和力結(jié)合位點位于纖溶酶原的個三環(huán)區(qū)域內(nèi)。纖溶酶原與纖維蛋白和α2-抗纖溶酶的相互作用由這些賴氨酸結(jié)合位點介導。天然葡萄糖原纖維蛋白原(Mr = 88,通過Lys76-Lys77肽鍵的纖溶酶水解,很容易將000)轉(zhuǎn)化為Lys-77-纖溶酶原(Mr = 83,000)。彈性蛋白酶催化裂解葡萄糖 - 纖溶酶原的Val441-Val442肽鍵產(chǎn)生功能活性的酶原,稱為Val-442纖溶酶原或微纖溶酶原。

纖溶酶原向纖溶酶的轉(zhuǎn)化通過多種機制發(fā)生,但都導致纖溶酶原的Arg560-Val561肽鍵水解,產(chǎn)生兩條鏈,其通過二硫鍵保持共價結(jié)合。

通過改進Castellino(3)的方法,利用凝膠過濾和親和層析,從新鮮冷凍的人血漿制備天然的葡糖胺原。通過使用賴氨酸類似物e-氨基己酸(3)從賴氨酸 - 瓊脂糖凝膠梯度洗脫分離葡糖 - 纖溶酶原(CHOI和CHOII)的兩種碳水化合物變體。纖溶酶原以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應,在-20℃下儲存。通過SDS-PAGE分析確定純度。

 

 

第1巷

人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)減少

第2巷

人類Glu-纖溶酶原CHOI(HCPG-0131)減少

第3巷

人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)減少

第4巷

人Lys-纖溶酶原(HCPG-0133)降低
標記:見藍+ 2_MOPS

第5巷

人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)未還原

第6巷

HumanGlu-Plasminogen CHOI(HCPG-0131)非紅色

第7巷

人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)非紅色

第8巷

人賴氨酸 - 纖溶酶原(HCPG-0133)未還原

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

每道1微克

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

血漿濃度

2.4μM(人類)(4)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶纖溶酶的前體

分子量

88,000(glu plasminogen)(5)
83,000(lys-plasminogen)(5)
38,000(val-plasminogen)(6)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 17.0(5)

 

等電點

6.2(??glu-plasminogen)(1)
6.7-8.3(lys-plasminogen)(1)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,24個鏈內(nèi)??二硫橋,5個三環(huán)區(qū)。

碳水化合物百分比

大約2%

 

  1. Robbins,KC,Methods in Enzymology,45,257(1976)。
  2. Collen,D.in Blood Coagulation,Zwaal,REA and Hemker,HC,eds。,pp.243-258,New York,Elsevier(1986)。
  3. Castellino,F(xiàn)J,et al。,Methods in Enzymology,80,365(1981)。
  4. Wohl,RC等,Thromb。Res。,27 523(1982)。
  5. Barlow,GH等,Biochemistry,23,2384(1984)。
  6. Sottrup-Jensen,L.,et al。,in Progress in Chemical Fibrinolysis and Thrombolysis,Vol。3,編輯。JF Davidson,7。RM Rowan,MM Samana,PC Desnoyers,pp.197-228,New York:Raven Press(1975)

 

 

 

HCPG-0130 人類 葡萄糖 -纖溶酶原

  |  

尺寸

1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

 

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

 

活動決定

<10ppm纖溶酶活性

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  

 HCPG-0131 人類 葡萄糖 -纖溶酶原CHOI

  •  

 

  •  

尺寸

1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  
  •  

 HCPG-0132 人體葡萄糖原纖維蛋白原CHOII

  •  

 

  •  

尺寸

1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  
  •  

 HCPG-0133 人類賴氨酸 - 纖溶酶原

  •  

 

  •  

尺寸

1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  
  •  

 BCPG-1130 Bovine glu-Plasminogen 

  •  

 

  •  

尺寸

1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

<100ppm纖溶酶活性

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  
  •  

 MCPG-5130 小鼠glu-plasminogen

  •  

 

  •  

尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

<100ppm纖溶酶活性

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  

 

 

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